利用斑马鱼模型评价遗传毒性

【评价原理】

彗星实验又称单细胞凝胶电泳实验，是一种通过检测DNA链损伤来判别遗传毒性的技术。当各种内源性和外源性DNA损伤因子诱发细胞DNA链断裂时，其超螺旋结构受到破坏，在细胞裂解液作用下，细胞膜、核膜等膜结构受到破坏，细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到电解液中，而核DNA由于分子量太大不能进入凝胶而留在原位。电泳过程中，如果DNA没有损伤，则将停留在原位，染色后呈圆形的荧光团，无拖尾出现。如果DNA受损，断裂的碎片进入到凝胶中，在电场的作用下，DNA碎片离开原位向阳极迁移，形成拖尾。DNA受损越严重，断裂越多，产生的碎片就越多、越小，则向阳极迁移的DNA碎片量就越多，迁移距离也越长，荧光染色后就能看见“彗星”样尾长并且荧光强度增强。尾距可以反映尾长和DNA含量，因此可通过尾距来评价DNA损伤程度。

我们评价斑马鱼遗传毒性评价有1个指标：1.尾距。

【实验方案】

将受测试斑马鱼分成若干组，含正常对照组和供试品组。其中正常对照组未经任何处理，供试品组添加供试品。加入供试品一段时间后，对每组斑马鱼进行收样，按照OxiSelect彗星分析试剂盒的说明方法处理样本，使用CASP彗星分析软件分析并采集数据，分析斑马鱼细胞尾距（TailMoment）。

【结果展示】

图1. 彗星实验表型图

可以看到，供试品组随剂量上升尾距明显增加。

【评价结论】

1.供试品组斑马鱼尾距与正常对照组相比明显增加，证明该供试品导致斑马鱼DNA损伤。

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