利用斑马鱼模型评价促消化功效

【评价原理】

消化不良是由胃动力障碍所引起的疾病，主要发病因素包括消化道运动的协调性不足和消化酶的分泌量降低等，通常表现为上腹部不适、疼痛、饱胀或反酸等。

人体中消化酶主要分为三大类：脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶，主要由胰腺分泌，可分别将脂肪、蛋白质和碳水化合物等大营养素分解成更容易被身体吸收的较小营养素。斑马鱼的消化道解剖结构、细胞结构与人类消化道相似，都具有内皮、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层，并从受精后5天开始，其消化道出现了自发、有节奏的肌肉收缩，与人体的肠蠕动非常相似。同时斑马鱼与哺乳动物胰腺发育也具有相似的形态发生过程：胰腺背侧芽和腹侧芽是从前肠内胚层演化形成的，经历了分支形态发生，产生内分泌胰腺和外分泌胰腺，外分泌胰腺功能是分泌包括脂肪酶、蛋白酶和淀粉酶等一系列的消化酶。

TNBS是一种半抗原，可与肠组织蛋白结合形成完全抗原，导致肠粘膜免疫系统针对该抗原的迟发性变态反应，并造成肠粘膜的损伤，诱发炎症反应，造成肠动力障碍，消化酶分泌降低，引起消化不良。采用TNBS诱导建立斑马鱼消化不良模型，给斑马鱼喂食一种特异性活体荧光染料尼罗红，同时通过供试品进行干预，通过分析斑马鱼胃肠道尼罗红的量（荧光强度）来评价样品的促消化功效，若样品有促消化功效，则斑马鱼肠蠕动加快，胃肠道内残留的尼罗红减少，荧光强度减弱。此外还可通过分析斑马鱼体内消化酶的活性来评价样品的促消化功效。

我们评价促消化功效有多个指标：1.胃肠道荧光强度；2.消化酶活性（脂肪酶、淀粉酶和胰蛋白酶）。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。其中正常对照组未摄入TNBS，模型对照组与服用供试品组都摄入了等量的TNBS。在摄入TNBS一段时间后，移除TNBS，摄入供试品和尼罗红。

服用一段时间供试品后，我们通过荧光显微镜检测斑马鱼胃肠道荧光强度。

【结果展示】

图1. 斑马鱼胃肠道荧光强度表型图

(红色荧光为尼罗红)

从实验结果可以看到，服用供试品组斑马鱼胃肠道荧光强度较模型对照组显著减少。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用或注射供试品组的斑马鱼胃肠道荧光强度较模型对照组显著减少。

2.本实验证实供试品具有促消化功效。

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