抗氧化 实验方案

一、实验动物

品系:C57BL/6小鼠

性别:雄性

年龄:

自然老化模型:10月龄

氧化损伤模型:8-10周龄

二选一


二、实验分组

1)正常对照组:空白对照

2)模型对照组:氧化损伤造模  只有用氧化损伤模型的才需要这个组

受试样品:

3)低剂量组:氧化损伤造模+低剂量的受试样品(参考值:人体服用量5倍)

4)中剂量组:氧化损伤造模+中剂量的受试样品(参考值:人体服用量10倍)

5)高剂量组:氧化损伤造模+高剂量的受试样品(参考值:人体服用量20倍)

每组数量一般为10-12只,最少8只

氧化损伤模型需要造模+给药后检测,自然老化模型不用造模即可直接给药后检测


三、实验方法

1)适应性饲养后,除空白组外各组小鼠腹腔注射0.1ml/Kg的D-半乳糖,每日一次,连续6周。

2)6周后,各组抽血检测血清内MDA水平,以MDA水平进行随机入组(自然老化模型无需上述步骤,直接检测血清内MDA水平即可分组)

3)按上述分组给予受试样品灌胃,每日1次,共28天。


四、检测指标

实验完成后处死各组小鼠,ELISA试剂盒检测以下指标:(血清or组织匀浆)

1)脂质氧化产物:MDA或8-Isoprostane

2)蛋白质氧化产物:蛋白质羰基

3)抗氧化酶活力:SOD或GSH-Px

4)抗氧化物质:GSH


五、判断标准

脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性,可判定该受试样品有助于抗氧化动物实验结果阳性。

方案

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