皮肤外植体模型评价样品紧致功效

【实验原理】

皮肤松弛是皮肤衰老最直观的表现，与自然老化、光老化、空气污染、生活习惯等密切相关。皮肤表皮变薄、真皮成纤维细胞减少、细胞外基质成分减少等都是造成皮肤松弛的主要原因。弹性纤维是细胞外基质的主要组成成分之一，广泛分布于机体的各个部位，其中最丰富的是皮肤、血管、韧带、气管等处。弹性纤维主要由弹性蛋白组成，因富含弹性且成细线条状，故称为弹性纤维，弹性纤维对维持皮肤弹性和紧致至关重要。

Verhoeff弹性纤维染色法（伊红复染）属于铁碘苏木素染色法，其染色原理是弹性蛋白与前弹性蛋白纤维可通过二硫键高度交联，经碘氧化后，部分二硫键转化为阴离子的硫酸衍生物，该衍生物呈强嗜碱性，对染液中的碱性染料苏木素有选择性吸收。之后采用伊红复染法，染色后粗纤维着色较深，细纤维染色效果稍差，细胞核和弹性纤维呈(蓝)黑色，其他组织呈红色，对比清晰。因此可利用组织切片和Verhoeff弹性纤维染色法（伊红复染）检测皮肤外植体组织中弹性纤维的密度，以此来评价样品的紧致功效。

【评价指标】

弹性纤维

【实验方案】

皮肤外植体获取与消毒——皮肤外植体处理及无菌培养——UV造模及加药处理：正常对照组（不处理）、模型对照组（UV辐射处理）、样品组（UV辐射+待测样品处理）——组织固定——包埋——切片——Verhoeff染色——显微镜拍照；

【结果展示】

图1  弹性纤维染色典型图（黄色箭头所指紫色线条为弹性纤维）

【参考文献】

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