皮肤外植体模型评价样品屏障修护作用

【实验原理】

皮肤是人体最大的器官，皮肤屏障在保护人体免受有害物质入侵中发挥着重要作用。皮肤屏障由角质层、角质细胞间的脂类及天然保护因子构成。表皮中角质层在皮肤屏障中起至关重要的作用，90%的皮肤屏障功能依赖角质层的形成。表皮向终末分化过程形成角质层，在这一过程中包括表皮表达终末分化特异性角蛋白的表达，还涉及其他几种重要的角蛋白中间丝相关蛋白的表达，包括丝聚合蛋白（Filaggrin）、兜甲蛋白（Loricrin）等。丝聚蛋白和兜甲蛋白参与角质包膜的形成，是表皮作为防御屏障和皮肤屏障修护的基础。

皮肤在接触刺激性较强的一些化学物质或紫外线后，会导致皮肤发生急性损伤，造成皮肤屏障损伤、干燥、炎症反应、红肿过敏等现象。阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠（Sodium lauryl sulfate，SLS）具有双亲性（亲水性和亲脂性）特征，在较大浓度下接触皮肤后能够损伤皮肤屏障，尤其是屏障中的脂质成分以及细胞膜，进一步造成皮肤细胞的损伤。

因此，可以利用皮肤外植体模型，通过SLS造模后将样品涂抹在皮肤外植体上，通过检测丝聚合蛋白（FLG）、兜甲蛋白（LOR）的表达，来评价样品的屏障修护作用。

【评价指标】

1、FLG蛋白表达

2、LOR蛋白表达

【实验方案】

皮肤外植体获取与消毒——皮肤外植体无菌培养——SLS造模及加药处理（空白对照组：不处理；模型对照组：SLS处理；阳性对照组：SLS+阳性药处理；样品组：SLS+待测样品处理）——固定——脱水——OCT包埋——冰冻切片——免疫荧光染色——显微镜拍照

【结果展示】

图1 皮肤外植体FLG蛋白表达

图2 皮肤外植体LOR蛋白表达

【参考文献】

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