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【实验原理】
ATP,是最重要的能量分子,在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响细胞的功能,通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降。萤火虫萤光素酶(firefly luciferase,也称荧光素酶)催化萤光素产生萤光时需要ATP提供能量,当萤火虫萤光素酶和萤光素都过量时,在一定的浓度范围内萤光的产生和ATP的浓度成正比。
因此,使用离体皮肤模型,通过添加待检测样品后检测离体皮肤组织中ATP的浓度来评价样品对皮肤线粒体功能的影响。
【评价指标】
离体皮肤ATP含量
【实验方案】
离体皮肤获取与消毒——离体皮肤处理及无菌培养——离体皮肤加药处理:正常对照组(不处理)、阳性对照组(阳性药处理)、样品组(待测样品处理)——组织匀浆——ATP检测试剂盒——酶标仪检测——数据处理;
【结果展示】(仅供参考,具体视实验结果而定)
图1 ATP浓度检测展示图
【参考文献】
[1]Eberlin S, Silva MSD, Facchini G, et al. The Ex Vivo Skin Model as an Alternative Tool for the Efficacy and Safety Evaluation of Topical Products. Altern Lab Anim. 2020;48(1):10-22.
[2]Bonora M, Patergnani S, Rimessi A, et al. ATP synthesis and storage. Purinergic Signal. 2012;8(3):343-357.
[3]Sreedhar A, Aguilera-Aguirre L, Singh KK. Mitochondria in skin health, aging, and disease. Cell Death Dis. 2020;11(6):444.
[4]Zhang X, Zuo X, Yang B, Li Z, Xue Y, Zhou Y, Huang J, Zhao X, Zhou J, Yan Y, Zhang H, Guo P, Sun H, Guo L, Zhang Y, Fu XD. . MicroRNA directly enhances mitochondrial translation during muscle differentiation. differentiation. Cell. 2014 Jul 31;158(3):607-19.
[5]Zhou H, Du W, Li Y, Shi C, Hu N, Ma S, Wang W, Ren J. . Effects of melatonin on fatty liver disease: The role of NR4A1/DNA-PKcs/p53 pathway, mitochondrial fission, and mitophagy. J Pineal Res. 2018 Jan;64(1).
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