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【实验原理】
自由基又叫游离基,人体内的自由基主要为氧自由基,占总量的95%,又被称为活性氧(ROS)。生物体进行呼吸代谢等氧化反应会产生ROS,在正常机体环境下,ROS具有稳定的清除系统,使得机体自由基含量保持较低浓度的平衡。当ROS含量超过人体清除能力,打破氧化与抗氧化的平衡时,就会引起氧化应激。皮肤作为人体最外层的组织,直接暴露于环境,更容易引起氧化应激造成氧化损伤,导致皮肤细胞和组织功能紊乱。
紫外线辐射是造成皮肤氧化应激和形成皱纹的主要因素,长期暴露于紫外线中会导致皮肤ECM降解、ROS累积、胶原蛋白等。因此可采用紫外照射皮肤外植体建模,通过检测皮肤外植体组织中ROS产生,以此来评价待测样品的抗氧化功效。
【评价指标】
ROS
【实验方案】
皮肤外植体获取与消毒——皮肤外植体处理及无菌培养——加样及造模处理:正常对照组(不处理)、模型对照组(UV辐射处理)、样品组(UV辐射+待测样品处理)——包埋——切片——荧光探针装载——荧光显微镜拍照——数据处理
【结果展示】
图1 皮肤外植体ROS荧光强度典型图及柱形图
【评价结论】
在本次实验条件下,与模型对照组相比,样品处理组的皮肤外植体组织中ROS荧光强度显著降低,表明样品具有抗氧化功效。
【参考文献】
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