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【实验原理】
紫外线辐射是造成皮肤老化和变黑的主要因素,长期暴露于紫外线中会导致皮肤ECM降解、DEJ功能紊乱、胶原蛋白和弹性蛋白减少、黑色素生成增多等。黑色素是由黑色素细胞产生的颜色从浅棕色到黑色的色素。紫外线照射通过促进黑素细胞的活性,增强酪氨酸酶活性,从而增加黑色素的生成,使皮肤暗沉和变黑。黑素细胞在合成黑色素后,通过黑素小体将黑色素转运至临近的角质形成细胞,因此,皮肤色素沉着不仅取决于黑色素的产生,而且还取决于黑色素向角质形成细胞的转移及向皮肤表面的分布。Masson-Fontana染色法是常见的黑色素染色方法,其原理是利用黑色素能将银氨溶液还原为金属银的特性即嗜银反应来显示黑色素,染色后的黑色素呈黑色,细胞核和细胞质呈粉红色。
因此可利用UV辐射皮肤外植体造模,通过Masson-Fontana染色检测样品作用后皮肤组织后黑色素的产生情况,以此来评价样品美白功效。
【评价指标】
黑色素
【实验方案】
皮肤外植体获取与消毒——皮肤外植体预处理及无菌培养——UV造模及加药处理:正常对照组(不处理)、模型对照组(UV辐射处理)、样品组(UV+待测样品处理)——组织固定——石蜡包埋——石蜡切片——Masson-Fontana染色——显微镜拍照
【结果展示】
图1 皮肤外植体黑色素染色典型图(黑色颗粒)
【参考文献】
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