透皮吸收-Franz扩散池测试方案

【实验原理】

化学物质的透皮吸收是指化合物作用于皮肤表面、进入表皮或真皮，并在该部位聚集和发挥作用的过程，影响物质透皮吸收的因素主要分为皮肤自身性质和其他因素。研究物质在皮肤中的渗透及分布，可以为产品配方优化、功效评价等提供重要的数据支持。弗朗茨（Franz）扩散法是经典的用于检测样品透皮吸收情况的实验方法，是将人或动物的离体皮肤安装在扩散池上，加入样品后，定时收集接收液，根据目标成分特性选择合适的检测方法，检测不同时间点收集接受液的目标成分含量变化，从而反映目标成分透皮吸收状况。

图 1. 弗朗兹扩散池示意图

【实验方案】

1、向Franz扩散池的接受室中加入接收液，并将配套的磁力搅拌转子放置于接收室内。

2、将准备好的离体皮肤清洗后，固定于Franz扩散池扩散室和接收室之间，将皮肤的角质层面朝向扩散室，真皮层朝向接收室放置。根据取样管的液体高度，补充接受液，使接受液与皮肤真皮层紧密接触。

3、将Franz扩散池固定于透皮吸收扩散仪上，调节水浴系统温度和搅拌速度，排尽气泡，同时设置空白对照组。

4、取适量待测样品添加至皮肤表面，进行透皮吸收实验。

5、在样品渗透的不同时间点（如2、4、8、24 h），使用取样针分别从接收池中收集一定体积的接收液，并补充相同体积的新鲜接收液至接受室内，在24 h测试时间终点收样。

6、24 h透皮实验结束后，用移液枪吸取新鲜接收液多次反复吹打清洗乳猪皮表面并定容。

7、24 h透皮实验结束后，将皮肤剪碎收集并加入新鲜接收液定容，超声30 min后离心取上清。

8、使用高效液相色谱（或其他检测方法，如LC-MSMS法、分光光度法）分别检测各组各时间点取样的接收液中目标成分的含量，以及24h后获取的皮上和皮中目标成分的含量。

9、数据处理：根据检测所得数据，计算样品的累积渗透量、扩散百分率、渗透系数、回收率。

（1） 累积渗透量

Q=

Cn：第 n 个取样点测得的目标物浓度 ；

：接收室中接受液体积；

Ci：第i次取样时接受液中目标物浓度， i=1~n-1；

：每次取样的体积；

（2）扩散百分率

P=Q/P0*100%

Q：接收室中每个时间点的累积渗透量

P0：扩散室中目标物的上样量。

（3）渗透系数

以累积渗透量对渗透时间做回归方程，方程斜率为渗透系数Kp，渗透系数即为渗透速率。

（4）回收率

回收率=时间终点目标物的总含量（皮上+皮中+皮下）/上样量×100%

【结果展示】

图 2. 累计渗透量典型图

图 3. 扩散百分率典型图

图 4. 渗透系数典型图

【评价结论】

在本次实验条件下，样品1和样品2具有透皮吸收作用，且样品2的渗透性优于样品1。

【参考文献】

[1]GB/T 27818-2011，化学品皮肤吸收体外实验方法[S].北京：中国标准出版社，2011.

[2]孙力华.巴马香猪皮肤离体后活力变化及影响因素[D].西南大学,2007.

[3]张静姝, 王言之.透皮吸收实验推导皮肤吸收值的规范化研究[J]. 毒理学杂志, 35(1):4.

[4]林婕,何聪芬, 董银卯. 化妆品功效成分的透皮吸收机理[J]. 日用化学工业, 2009, 039(004):275-278.

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