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1、实验原理
皮肤保湿系统由内而外对保湿的作用可以依次归纳为:捕水、锁水、活水和储水。储水:真皮层的透明质酸能吸收大量水分,像皮肤的储水库,为整个皮肤的水润提供储备,同时也填充真皮层,使真皮层结构更加完整。活水:水通道蛋白将水、甘油等小分子跨膜传输,参与表皮水合,这一过程称为活水。锁水:紧密连接蛋白就像一根拉链一样将相邻的角质形成细胞连接起来,封闭了细胞和细胞间的空隙,从而阻止水分通过细胞旁路过度挥发。角化终末的标志蛋白角蛋白和兜甲蛋白等及丝聚蛋白共同形成了角质细胞的强度和外形,并与脂质通过共价键结合,共同促进角质层的形态更紧密和完整,避免水分过多向外界散失。捕水:丝聚蛋白最终形成天然保湿因子,帮助细胞从外界捕捉水分。
图1.皮肤保湿系统
透明质酸由透明质酸合酶(HAS)合成,包括HAS1、HAS2和HAS3三种亚型。其中,HAS2主要在角质形成细胞中发挥作用,而HAS3则在表皮中更为活跃。透明质酸的降解主要由透明质酸酶(HYAL)完成,这些酶通过水解透明质酸的糖苷键将其分解为小片段。透明质酸(HA)是一种高分子质量的线性多糖,由N-乙酰葡糖胺和葡萄糖醛酸交替排列组成,其独特的分子结构使其具有极强的吸水性,能够吸附自身重量数千倍的水分,从而为皮肤提供强大的保湿能力。透明质酸可以调节AQP3的活性,促进水分在细胞间的运输,随着年龄的增长,皮肤中透明质酸的含量显著下降,导致皮肤保湿能力减弱,出现干燥、松弛和皱纹。研究表明,外源性补充透明质酸(如通过涂抹或口服)可以有效改善皮肤的保湿状态,延缓皮肤老化。
本实验拟利用人永生化角质形成细胞构建实验模型,通过检测HA含量,HAS1、HAS2、HAS3、AQP3、CD44、FLG等基因相对表达量,屏障相关因子含量检测,多维度评价样品是否具有保湿功效。
2、检测项目
3.检测流程
4.部分结果展示
图1.AQP3基因相对表达量柱形图
与正常对照组比,***p<0.001
图2.LFG基因相对表达量柱形图
与正常对照组比,**p<0.01
图3.HAS1基因相对表达量柱形图柱形图
与正常对照组比,*p<0.05
图4.HAS2基因相对表达量柱形图
与正常对照组比,*p<0.05
图5.HAS3基因相对表达量柱形图
与正常对照组比,**p<0.01
图6.HA含量柱形图
与正常对照组比,**p<0.01
5.结果描述
根据测试结果,与正常对照组比,阳性对照组的HA含量,HAS1、HAS2、HAS3、AQP3、CD44、FLG基因相对表达量等显著增加,说明本实验有效且可靠。
6.参考文献
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