利用斑马鱼评价供试品修护作用

【实验原理】

机械损伤将产生皮肤组织的结构性破坏，斑马鱼尾鳍具有强大的自我再生功能。切断尾鳍后，伤口立即紧缩、上皮细胞覆盖，数小时内出现炎症反应，伤口处中性粒细胞的数量增多，转基因中性粒细胞荧光斑马鱼的中性粒细胞可在荧光显微镜下被明显观察。因此可以通过尾鳍再生速度、伤口附近的中性粒细胞数量评价供试品修复功效。

【实验方法】

将斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组。正常对照组不做处理，模型对照组和供试品组均采用手术方法定量切断尾鳍，从而完成造模处理，供试品组中添加一定浓度的受试化妆品。避光孵育一段时间后，将各组斑马鱼在体视显微镜下拍照并保存图片，用高级图像分析软件对斑马鱼尾鳍面积进行定量分析；用高级图像分析软件对斑马鱼尾鳍损伤部位的中性粒细胞进行计数。

【评价指标】

1、组织再生-损伤部位恢复

2、伤口愈合-损伤部位炎症细胞数量

【结果展示】

（*展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）

1、斑马鱼尾鳍面积

图1. 斑马鱼尾鳍面积表型图

2、尾鳍损伤部位中性粒细胞、炎症因子的表达量（提供柱状图）

图2 斑马鱼尾鳍中性粒细胞表型图黄色虚线区域为计算区域，绿色荧光点为中性粒细胞

【评价结论】

1、经过斑马鱼对比实验，供试品组与模型对照组相比，斑马鱼尾鳍面积明显增加。

2、经过各组斑马鱼的对比实验，供试品组的斑马鱼中性粒细胞数目与模型对照组相比明显减少。

3、本实验证实了该供试品具有修护功效。

【参考文献】

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