斑马鱼功效评价页面,主要有四方面内容:表型分析、生化指标分析、分子生物学分析、行为学分析。

表型分析

表型是指斑马鱼在某一特定环境条件下所展现的可观测特征,如外貌、器官、生理特征、行为等。表型是生物表现出来的性状,其由基因型决定,可直观反映药物或者样品的效果,但是表型也受其它因素的影响,比如环境因素、表观遗传等等。

斑马鱼和人类疾病相关基因的相似度高达87%,拥有肝脏、心脏、肾脏、胰脏和血脑屏障等和人类高度相似的器官,功能相同,且生理反应高度一致。斑马鱼已广泛应用于人类疾病模型来研究疾病的机理机制以及对药物和保健品的安全性及功效进行评估。

一、功效评价

环特生物功效评价目前涉及到170多种模型,其中包含药物、保健食品、功能性食品、化妆品功效评价。并且,目前培养有几十种转基因斑马鱼品系,可以用于功效评价。

功效评价模型

环特斑马鱼技术平台功效评价服务体系

二、安全性评价

在2011年,国际上应用斑马鱼技术评价被科学界认为是评价毒性最敏感的体内方法。且OECD与中国已公布多个斑马鱼化学品毒性评价标准。

安全性评价模型

环特生物斑马鱼技术平台安全性评价服务体系

环特生物在利用斑马鱼进行毒性研究过程中,严格按照ISO 15088和OECD TG 236标准操作,斑马鱼在接触受试物后数小时,可在解剖显微镜下观察斑马鱼胚胎或幼鱼发育状态以及各个器官毒性情况。当遇到有毒有害的物质,斑马鱼胚胎会表现出卵凝结、尾部未分离、体节缺失、无心跳等情况,幼鱼则会出现心包水肿、血栓、出血、身体发育异常等表型。


生化指标分析

斑马鱼生化指标分析平台是通过染色、生化试剂盒等方法对功效进行测试,如ROS染色、脂肪染色、病理切片或酶含量检测等。

生化指标分析平台配备有全自动快速研磨仪、全波长多功能酶标仪、解剖显微镜、电动聚焦连续变倍荧光显微镜、蔡司荧光显微镜等先进仪器,利用斑马鱼进行生化指标观察最大的优势是斑马鱼幼鱼通体透明,染色后可直接置于显微镜下观察,实验结果更加直观。

生化功效研究示例:

在脂肪肝模型中,可直接利用油红O染色观察斑马鱼肝脏位置脂肪染色强度,无需解剖。

图1. 斑马鱼尾部血管甘油三酯含量典型图

(箭头所指的红色部位为甘油三酯)

在高糖高脂模型中,可利用胆固醇荧光探针,在荧光显微镜下观察斑马鱼血管胆固醇荧光强度。

图2. 斑马鱼尾部血管胆固醇含量典型图

在相关疾病模型中的对靶器官进行HE染色,并对组织病理切片进行记录。

图3. 斑马鱼眼组织病理切片(黄色虚线标注眼睛,E=眼睛)

图4. 肌肉组织病理切片

生化指标分析用到的先进仪器,展示如下:


斑马鱼行为学分析

▼ 斑马鱼行为分析简介

斑马鱼的胚胎发育迅速,受精后几小时内,内脏开始出现。甩尾、盘旋和抽搐等运动最早发生在受精后17小时。利用斑马鱼行为分析系统可以监控斑马鱼幼鱼活动和运动方式,可反映出样品对癫痫、运动障碍、神经发育等方面的影响。例如,在改善睡眠模型中,可以利用行为学分析斑马鱼觉醒活动量、觉醒总时间等指标,来确认样品是否具有改善睡眠作用;同时,斑马鱼行为分析仪可以通过改变内部光照条件,来模拟昼夜变化,因此可以利用行为学分析进行昼夜节律有关的研究。

▼ 实验服务项目

● 基本运动和感觉运动类:自主游泳实验、胎动实验、触碰反应实验、成鱼力竭游泳实验

● 抑郁/焦虑类:新型水箱实验、明暗箱实验

● 学习记忆和认知类:T迷宫实验、十字迷宫实验、“O”弯实验

● 社会交互类:社会交互实验

▼ 显著优势

● 可以直接使用96孔板监测斑马鱼幼鱼的行为轨迹;

● 高通量,可同时分析192条幼鱼;

● 应用广泛,可用于基因功能分析、药物筛选、毒性评价、昼夜节律评估等领域。

▼ 部分实验结果展示

1斑马鱼行为学分析部分实验结果展示

▼ 使用的先进仪器

● 斑马鱼血流分析系统  ● 斑马鱼强迫游泳系统  ● 斑马鱼成/幼鱼2D行为分析系统  ● 斑马鱼行为分析系统(3D)

2行为分析设备

3行为分析设备


分子生物学分析

分子生物学分析平台主要是分子水平研究来阐明某种现象的本质。斑马鱼的基因组与人类的同源性高达87%,对研究人类病理过程具有非常大的价值。

本公司分子生物学分析平台技术包含定量PCR检测、Western blot蛋白分析、ELISA试剂盒检测等,配备有全自动快速研磨仪、PCR扩增仪、荧光定量PCR仪、高速冷冻离心机、紫外-可见光分光光度计、微孔板迷你离心机、全波长多功能酶标仪、凝胶成像仪等先进设备。

本公司可提供以下分子生物学相关技术:

● qPCR

● Western blot

● ELISA

● 免疫荧光

● 免疫组化

● 转录组学

● 微生物群落16S rRNA测序

● 蛋白组学

● 代谢组学

分子生物学分析用到的先进仪器,展示如下:


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